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在之前的栏目中，我们详细介绍了TaqMan探针最全详解修饰引物/探针—TaqMan探针，本期为大家带来的是双淬灭探针，随着PCR检测技术的发展，对于探针的灵敏度、精确度、荧光强度、背景信号等技术指标提出了更严苛的需求，普通的荧光探针往往因过高的荧光背景，而无法满足不了这类的检测需求，因此双淬灭探针应运而生，与普通探针相比，双淬灭探针的背景信号更低，目前广泛应用于化学、环境、生物、医学等研究领域。

普通探针VS双淬灭探针

双淬灭探针工作原理

双淬灭探针与普通探针基本工作原理一致，普通探针（TaqMan探针）原理可点击文章开头的链接，双淬灭探针的主要区别是新增了一个探针内部淬灭基团，使得背景信号更低。

普通探针：由于荧光基团与淬灭基团间存在距离，因此会出现荧光“泄漏”，从而产生背景信号，影响检测结果判读。

2、默认情况下，内部XEN修饰会位于距离荧光基团9nt的位置，不需要自行选位。

3、可选5’荧光基团:VIC、FAM、HEX、Cy3、Texas Red-X；3’淬灭基团：BHQ1等灵活选择。

双淬灭探针的应用

1、适合替换长度大于25 nt的普通探针，或背景信号高的qPCR实验。

2、适合模板量较少且对背景荧光敏感的dPCR实验。

3、适合高精度分子诊断实验，双淬灭探针灵敏度更高。

4、适合体系复杂的多重PCR实验。

文献参考

伍嘉豪, 张嫦丽, 王娴默,等. 双淬灭TaqMan探针应用于新型冠状病毒核酸检测的初步研究[J]. 病毒学报, 2022(004):038

Aurora D , Meluleki Z , Turner A S , et al. Copy Number Variation Affecting the Photoperiod-B1 and Vernalization-A1 Genes Is Associated with Altered Flowering Time in Wheat (Triticum aestivum)[J]. PLoS ONE, 2012, 7(3):e33234-

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